Étude de l'antibiorésistance dans un cheptel aviaire traité par les antibiotiques et l’utilisation des extraits végétaux en thérapie vétérinaire

Abstract

Résumé Le but de cette étude a été de contribuer à la résolution de la problématique de l’antibiorésistancein vitro et in vivo des bactéries suspectes pathogènes chez les poulets de chair, et ce, de par le retour à la nature et ses secrets dans le traitement des animaux par le bais des plantes médicinales et leurs substances bioactifs.

Sur 75 souches isolées des organes de poulets morts et malades appartenant aux trois familles : les Enterobactereaceae ; les Staphylococeae et les Pseudomonaceae, un antibiogramme a été réalisé afin de sélectionner les souches offrant le plus de résistance.

Les huiles essentielles de six plantes médicinales choisies selon un questionnaire réalisé auparavant sont extraites par hydro distillation (Clevenger). Ces plantes avec leurs rendements respectifs sont : T. vulgaris (2.75 %), S. officinalis (2.50 %), R. officinalis (2.43 %), T.capitatus(1.82 %), Rutachalepensis(0.93 %) et A. herba alba (0.90 %).

L’aromatogramme sur milieu gélosé de dix souches résistantes aux différents antibiotiques a été réalisé. Les diamètres d’inhibition résultant - dus aux huiles essentielles citées ci-dessus- ont été compris entre 0 mm et 53.33±1.53 mm, autour des disques de 5 µl, entre 0 mm et 52.33±2.52 mm, autour des disques de 10 µl et de 0 mm et 56.67±1.15 mm autour des disques de 15 µl,

Les résultats des CMI des huiles étudiée ont été encourageants, les Huiles de Thymuscapitatus,RosmarinusofficinalisetSalviaofficinalisse sont rangés dans une fourchette comprise entre 1.25et 20 (μL.mL-1) avec un effet bactéricide / bactériostatique, sauf l’Huile Salviaofficinalis présente un effet bactéricide. Les Huiles de Tymusvulgaris, Artemisia herba alba et Rutachalepensisont une CMI respectivement de1.25 à 10 (μL.mL-1), 5 à 40 (μL.mL-1), 1.25 et 40(μL.mL-1), l’effet est bactéricide pour ces huiles.

Un essai thérapeutique in vivo à base d'huile essentielle de de T. vulgaris, en vue de pallier au problème de résistance aux antibiotiques a été réalisé. Pour ce faire un isolat d’Escherichia coli doté d’une résistance à plusieurs antibiotiques d'intérêt vétérinaire a été choisi. La DL50 de T.vulgarisest de 4500 mg / kg.

Quatre groupes ont été préparés G I (témoin) ; G II (administration par voie orale de l’huile essentielle de 450 mg/kg/j pendant cinq jours) ; G III (administration par voie intramusculaire 0.1ml d’un inoculum de 88.107 UFC / ml d’E. coli) ;G IV (administration par voie intramusculaire 0.1ml d’un inoculum de 88.107 UFC / ml d’E. coli puis traité avec une dose de 450 mg/kg/j de HE de T.vulgaris par voie orale pendant cinq jours).

Les limites des valeurs usuelles ont été calculées et pour les principaux paramètres biochimiques et hématologiques.

Les différences statistiquement évalué par rapport à placebo, le groupe GIII à enregistrés une perturbation significative (P < 0,05) pour une glycémie, CRP, GB, ASAT et ALAT. Alors que le groupe GIV à enregistrés une perturbation significative pour la glycémie, CRP, ASAT et créatinine.

Le Groupe III a enregistré des lésions de différents organes (foie, sacs aériens, péricardite) d’une moyenne (m±esm) de 10.60±0.50 plus grande que celle du Groupe IV

3.60±1.28, qui présente statistiquement une différence significative entre les deux échantillons t=5.052 (p<0.05). Le Groupe III a enregistré 80% de morts, le double du groupe IV. Aucune de mortalités et de modification lésionnels ont été signalés aux groupes I et II.

Ce travail à détecter l’importance de huile essentielle de Thymus vulgaris comme agent anti E.coli et améliore quelques paramètres biochimique et hématologique chez le poulet de chair.

Mots clé : Antibiorésistance; Agents microbiens; Antibiogramme; Extraits des plantesmédicinales ; Aromathérapie ; Volaille.

Abstract The purpose of this study is to solve a problem of in vitro antimicrobial resistance in pathogenic isolated broiler bacteria, in return to nature and its secret in the treatment of animals and that by medicinal plants and their bioactive substances.

Out of 75 isolated strains of dead and diseased chicken organs belonging to the three families, Enterobactereaceae; Staphylococcus and Pseudomonaceae, an antibiogram performed on these last strains in order to select the most resistant strains.

The essential oils of six medicinal plants chosen by a previously completed questionnaire are extracted by hydro distillation (Clevenger). The plants with their yields are: T. vulgaris (2.75 %), S. officinalis(2.50 %), R. officinalis(2.43 %), T. capitatus(1.82 %),Rutachalepensis(0.93 %)and A. herbaalba(0.90 %).

The aromatogram of ten strains resistant to the various antibiotics is carried out, measuring the activity of the oils on agar medium, this test has provided the following results: the essential oils of various harvested plants give inhibition diameters of between 0 mm and 53.33 ± 1.53 mm, around the 5 μl disks, and between 0 mm and 52.33 ± 2.52 mm, around the 10 μl disks, whereas around the 15 μl disks, these diameters vary between 0 mm and 56.67 ± 1.15 mm.

The results of the MICs of the oils studied are encouraging, the oils of Thymuscapitatus, Rosmarinusofficinalis and Salvia officinalis share a MIC between 1.25 and 20(μL.mL-1) with a bactericidal / bacteriostatic effect, except for the Salvia Officinalis oil has a bactericidal effect. The oils of Thymus vulgaris, Artemisia herbaalba and Rutachalepensis have a MIC of respectively 1.25 to 10 (μL.mL-1), 5 to 40 (μL.mL-1), 1.25 and 40 (μL.mL-1), the effect is bactericidal for these oils.

An in vivo therapeutic trial based on T. vulgaris essential oil to overcome the problem of antibiotic resistance has been realized. To do this, an isolate of Escherichia coli with resistance to several antibiotics of veterinary interest was chosen. The LD50 of T. vulgaris was 4500 mg / kg.

Four groups were prepared (control); G II (oral receipt of 450 mg / kg / day essential oil for five days); G III (intramuscularly received 0.1ml of an inoculum of 88.107 CFU / ml of E.coli) G IV (received intramuscularly 0.1ml of an inoculum of 88.107CFU / ml of E. coli thentreated with a dose of 450 mg / kg / day orally for five days).

The limits of the usual values were calculated for the main biochemical and hematological parameters.

The differences statistically assessed versus placebo, group GIII recorded a significant disturbance (P <0.05) for blood glucose, CRP, GB, ASAT and ALAT. While the GIV group has recorded a significant disturbance for blood glucose, CRP, ASAT and creatinine.

Group III recorded lesions of different organs (liver, air sacs, pericarditis) of an average (m ± esm) of 10.60 ± 0.50 larger than that of Group IV 3.60 ± 1.28, which statistically shows a significant difference between two samples t = 5.052 (p <0.05). Group III recorded 80% of deaths, double the IV group. No mortalities and lesions were reported to groups I and II.

In this work we have demonstrated the importance of the essential oil of T. vulgaris manifests itself as an antimicrobial agent and a substance capable of improving certain hematological and biochemical parameters in broiler chickens.

Key words: Antibiotic resistance; Microbial agents; Antibiogram; Extracts of medicinalplants; Aromatherapy; Poultry. مُـلَّـخَـص الغرض من هذه الدراسة هو حل مشكلة مقاومة المضادات الحيوية في المختبر لبكتيريا معزولة مسببة للأمراض عند الدجاج اللاحم، والعودة إلى الطبيعة وسرها في علاج الحيوانات من حيث النباتات الطبية والمواد الخاصة النشطة بيولوجيا . من أصل 75 سلالة معزولة من أعضاء الدجاج الميتة والمريضة التي تنتمي إلى فئات ثلاثة، إنتيروباكتيراسي: المكورات العنقودية. الزائفة، ومعالجتهم بمضاد حيوي نفذ على هذه السلالات الأخيرة من أجل اختيار سلالات الأكثر مقاومة. يتم استخراج الزيوت الأساسية من ستة نباتات طبية التي تم اختيارها عن طريق استبيان ، الاستخراج عن طريق التقطير المائي (كليفنجر). النباتات مع عائداتها هي: Thymus vulgaris (2.75%), Salvia officinalis (2.50%) Rosmarinusofficinalis(2.43%), Thymus capitatus(1.82%), Rutachalepensis(0.93%) و.Artemisia herbaalba(0.90%) وaromatogrammeيتم على عشرة سلالات مقاومة للمضادات الحيوية المختلفة، قمنا بقياس نشاط الزيوت على الوسط المغذي أجار، قدم الاختبار نتائج التالية: الزيوت الأساسية من النباتات التي تحصد مختلفة تعطي بأقطار تثبيط تتراوح بين 0 مم و 53.33 ± 1.53 ملم، حوالي 5 أقراص (μL.mL-1) ، وبين 0 و 52.33 ملم ± 2.52 ملم، حوالي 10 أقراص (μL.mL-1) ، في حين أن حوالي15 (μL.mL-1) من الأقراص، هذه بأقطار تتراوح بين 0 مم و56،67 مم ± 1.15. درست نتائج MIC الزيوت مشجعة، والزيوت من Thymus capitatus ، Rosmarinusofficinalis وSalvia officinalis حصة الحد الأدنى للتركيز مثبط (MIC) تتراوح بين 1،25 حتي 20 (μL.mL-1) مع قاتل جراثيم/مثبط جراثيم، باستثناء Salvia officinalis له تأثير قاتل للجراثيم. الزيوت من نوع Tymus vulgaris, Artemisia herba alba et Rutachalepensis لها MIC على التوالي de1.25 à 10 (μL.mL-1), 5 à 40 (μL.mL-1), 1.25 et 40 (μL.mL-1 التأثير لهذه الزيوت هو تأثير قاتل للجراثيم. تجربة علاجية حيوية تعتمد على الزيت العطري ، من أجل حل مشكلة مقاومة مضادات الميكروبات في دجاج التسمين. حساب LD50 من زيت Tymus vulgaris الشائع هو 450مل/مغ. تم إعداد أربع مجموعات المجموعة الاولى (السيطرة) ؛المجموعة الثانية (استلام فموي من 450 ملغ / كغ / يوم من الزيت العطري لمدة خمسة أيام) ؛ المجموعة الثالثة (حقن 0.1ml على مستوى العضلي من 88.107 خلية / مل من E. coli ). المجموعة الرابعة (حقن 0.1 ملعلى مستوى العضلي من 88.107 خلية / مل منE. coliو ثم علاجها بجرعة مقدارها 450 ملغ / كغ / يوم لمدة خمسة أيام) تم حساب حدود القيم المعتادة للمعلمات البيوكيميائية والدموية الرئيسية. التغيرات تقييمها إحصائيا مقارنة مع الدواء الوهمي، سجلت مجموعةالثالثةاضطراب كبير (P <0.05) مستويات الجلوكوز، CRP، GB، ASAT و ALAT بينما سجلت مجموعةالرابعةانخفاض كبيرًا في جلوكوز الدم ، CRP ،ASAT والكرياتينين. سجلت المجموعة الثالثةآفات أجهزة مختلفة (الكبد والأكياس الهوائية، التهاب التامور) مقدرة ب 10.60 ± 0.50 أكبر من المحصل عليها في المجموعة الرابعة 3.60 ± 1.28 ، والتي تُظهر إحصائيًا اختلافًا كبيرًا بين العينتين (t = 5.052 (p <0.05. سجلت المجموعة الثالثة 80 ٪ من الوفيات ، ضعف المحصل عليه في المجموعة الرابعة. لم يتم تسجيل عن حالات الوفاة والآفات في المجموعتين الأولى والثانية. يكشف هذا العمل أهمية زيتThymus vulgaris كعنصر مضاد لـ E. coli ويحسن بعض المعايير البيوكيميائية والدموية في دجاج التسمين.

الكلمات المفتاحية:المقاومة للمضادات الحيوية ; العوامل الميكروبية ; حساسية المضادات الحيوية ; مستخلصات من النباتات الطبية ; العلاج العطري ;الدواجن