Caractérisation biomoléculaire et biotechnologique des souches de « Saccharomyces cerevisiae » issues des cépages Algériens

Abstract

RESUME Le raisin est un fruit exemplaire de la diversité microbienne, il est considéré comme l’habitat de multiples micro-organismes parmi les quels les levures. Dans ce cadre, cette étude consiste à isoler des souches indigènes de la levure « Saccharomyces cerevisiae » à partir de moût raisin (1er jour de fermentation) issus des différents cépages algériens (Muscat noir, Cinsault et Carignan), et à les identifier d’abord sur le plan microscopique puis moléculaire où on s’intéresse d’une part à l’étude de la région Delta par PCR-Delta, et d’autre part la variabilité de l’ADNr , plus exactement la région ITS1-5,8S-ITS2 par PCR-ITS-RFLP. Sur les 34 isolats de levures isolés, 06 genres et 12 espèces différentes ont été caractérisées selon leur profil moléculaire et différenciées par l’emploi de deux enzymes de restriction (HinfI et HaeIII). Parmi ces espèces, 03 souches de Saccharomyces cerevisiaeMn11 (9ème j) (AT), Cn11 (9ème j) (MOS) et Cr3 (9ème J) (MOS) ont été identifiées, ayant des formes végétatives ovoïdes, se propagent par bourgeonnement monopolaire, caractérisées par un puissant pouvoir fermentaire (forte production de CO2 et d’éthanol) et possédant l’enzyme « invertase ». Les 31 souches restantes sont des espèces non Saccharomyces, identifiées comme appartenant à différents genres tels que Torulaspora, Candida, Pichia, Hanseniaspora et Zygosaccharomyces. Elles se multiplient par différents modes de reproduction (monopolaire, bipolaire et multipolaire) et sont caractérisées par des formes végétatives cylindriques, parfois sphériques, allongées ou courtes. Cependant, les levures non Saccharomyces sont très présentes, même majoritaires, dans les moûts de raisin du Muscat noir, du Cinsault et de Carignan par rapport aux levures Saccharomyces. Mots clés: Raisin, Levures, Saccharomyces cerevisiae, PCR-Delta, PCR-ITS-RFLP, Invertase. SUMMARY The grape is an exemplary fruit of the microbial diversity, it is considered as the habitat of multiple microorganisms among which the yeasts. In this framework, this study consists of isolating native strains of the "Saccharomyces cerevisiae" yeast from grape must (first day of fermentation) from different Algerian grape varieties (Muscat noir, Cinsault and Carignan), and to identify them first on the microscopic and then on the molecular level, where we are interested on the one hand in the study of the Delta region by PCR-Delta, and on the other hand the variability of the rDNA, region ITS1-5,8S-ITS2 by PCR-RFLP-ITS. Of the 34 isolated yeast isolates, 06 genera and 12 different species were characterized according to their molecular profile and differentiated by the use of two restriction enzymes (HinfI and HaeIII). Among these species, 03 strains of Saccharomyces cerevisiae Mn11 (9th J) (AT), Cn11 (9th J) (MOS) and Cr3 (9th J) (MOS) were identified, with ovoid vegetative forms, propagated by monopolar budding, Characterized by a strong fermentative power (high production of CO2 and ethanol) and possessing the enzyme « invertase». The remaining 31 strains are non-Saccharomyces species, identified as belonging to different genera such as Torulaspora, Candida, Pichia, Hanseniaspora and Zygosaccharomyces. They multiply by different modes of reproduction (monopolar, bipolar and multipolar) and are characterized by cylindrical vegetative forms, sometimes spherical, elongated or short. However, non-Saccharomyces yeasts are very present, even in the majority, in the grape musts of Muscat noir, Cinsault and Carignan compared to Saccharomyces yeasts. Key words: Grape, Yeasts, Saccharomyces cerevisiae, PCR-Delta, PCR-RFLP-ITS, Invertase.